Estandarización de un modelo murino…
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hemoglobina y el tipo de progresión e infección que cursa el ratón. Así, los ratones
del grupo con EMC presentaron valores de hemoglobina (Hb) prácticamente
constantes durante el proceso infectivo (Figura 3C1), mientras que en aquellos que
no desarrollaron la infección cerebral, PLAP y PRAP, (Figura 3C2 y C3) la
concentración de Hb disminuyó al 50% en la primera semana p.i., debido,
posiblemente, a la anemia que sufren como consecuencia de la hiperparasitemia
que alcanzan estos dos grupos.
3.3. Permeabilidad de la barrera hematoencefálica (prueba del Evan’s Blue)
El cambio de la permeabilidad de la BHE secundario al secuestro de la
microvasculatura (18, 36, 37) explica el edema cerebral que frecuentemente
acompaña a la malaria cerebral. Con el fin de evaluar si las anormalidades en la
BHE se asocian a la evolución clínica de la patología cerebral procedimos a valorar
la integridad de la misma en el modelo murino clasificado por estadios, utilizando
el test de coloración con la solución de “Evan’s Blue”. Como se muestra en la figura
4A, el tejido cerebral extraído de los ratones del grupo MC adquirió la coloración
azul propia de la tinción utilizada indicativa del daño en la función de la barrera
hematoencefálica. La alteración en la BHE aumentó a medida que progresaba la
patología cerebral. En la figura 4 se observa que, en el primer estadio,
asintomático, la BHE está aún funcional, siendo impermeable a la entrada de la
solución de tinción, pero dicha permeabilidad cambia según progresa el cuadro
clínico neurológico, detectándose ya en el estadio II entrada del colorante al tejido
cerebral, lo que se relaciona con el inicio de los síntomas de la MC. La ruptura más
severa en la BHE se detectó en el estadio IV, donde el cerebro adquirió una intensa
coloración azul, siendo ese momento cuando los animales manifestaron los
síntomas más graves de MC como convulsiones o el coma. En la misma figura se
muestran cuatro cerebros que fueron extraídos de los animales pertenecientes a
los otros dos grupos de infección caracterizados, dos del grupo PLAP (Figura 4C) y
dos del grupo PRAP (Figura 4B), y tratados de la misma forma con la solución de
Evan’s Blue. Como se puede observar en las imágenes, en ninguno de estos casos
aparecen evidencias de ruptura de la BHE, ya que no hay acumulación de
coloración azul en el parénquima cerebral, comportándose igual que la muestra del
control sano. El cerebro de los animales del grupo PLAP, fue extraído entre el día
10 y 12 p.i., y en el grupo PLAP las muestras se tomaron en el día 6 p.i., cuando
presentaban altos niveles de parasitemia, síntomas de decaimiento general y
anemia severa.
