An. R. Acad. Farm. vol 79 nº 2 2013 - page 75

J. R. Lacadena
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prematura del citoplasto, mejorando el desarrollo de embriones
SCNT. Así, los ovocitos humanos se mantuvieron en presencia de
cafeína 1,25 nM durante la eliminación del huso del ovocito MII y la
fusión celular somática.
b.
A partir de 8 ovocitos de una donadora (A) se obtuvieron 5
blastocistos SCNT de los que derivaron 4 líneas NT-­‐ESC. Las células
donadoras fusionadas eran fibroblastos dermales de fetos femeninos
sincronizados en fase G0/G1.
c.
Para comprobar la reproducibilidad de la técnica se utilizaron 15 y 5
ovocitos de otras dos mujeres donantes (B) y (C), respectivamente, y
como células somáticas a fusionar en ambos casos fibroblastos
epiteliales de un paciente con síndrome de Leigh (enfermedad
mitocondrial). Se obtuvieron 4 y 3 blastocistos de la procedencias
(B) y (C), respectivamente, y una línea NT-­‐ESC en cada caso.
d.
Con el fin de evaluar la posibilidad de utilizar en la terapia
regenerativa del futuro las células NT-­‐ESC obtenidas con las técnicas
mencionadas, se comprobó la pluripotencia de tales líneas celulares
examinando la expresión de marcadores genéricos de células
troncales mediante técnicas inmunocitoquímicas y la expresión de
los factores de transcripción OCT-­‐4, NANOG, SOC2, SSEA-­‐4, TRA-­‐1-­‐
60 y TRA-­‐1-­‐81. Asimismo se demostró que eran capaces de originar
tumores con representación de las tres capas germinales
embrionarias, así como formar de manera espontánea en cultivos en
suspensión cardiomiocitos que tenían pulsos de contracción.
e.
Finalmente, los autores recomiendan que los ovocitos que se utilicen
en experimentos para obtención de líneas NT-­‐ESC deben ser de
buena calidad, por lo que recomiendan que no se deben utilizar las
técnicas convencionales de estimulación ovárica de los programas
de FIV, sino que deben establecerse técnicas específicas con dosis
adecuadas de gonadotropinas y regímenes de supresión de pituitaria.
Asimismo recomiendan hacer determinados estudios genéticos de
las posibles donantes de ovocitos.
4. ASPECTOS ÉTICOS Y LEGALES
Los intentos de abrir las puertas a la clonación terapéutica humana puede
que resulten innecesarios si llega a hacerse una realidad clínica la reprogramación
de células somáticas adultas utilizando las técnicas de Yamanaka de obtención de
las células iPS, evitando con ello la obtención y destrucción de embriones humanos.
No obstante, Mitalipov y colaboradores argumentan que, dado que los embriones
SCNT apenas si tienen presente en su citoplasma ADNmt procedente de la célula
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