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C. de la Rosa y col.
2.2. Microorganismos totales y vivos
En los
hábitats acuáticos vive una microbiota autóctona muy variada, tanto en
tamaño y estado fisiológico como en actividad metabólica. Para determinar el número y la
morfología de todos los microorganismos presentes en estos ambientes, la técnica más
adecuada es el recuento directo con un microscopio de fluorescencia, utilizando varios
fluorocromos que nos permiten distinguir los microorganismos muertos de los vivos. Los
colorantes empleados en esta investigación han sido: naranja de acridina, Syto
®
9 y yoduro
de propidio del kit “BacLight Live/Dead”. Las muestras teñidas se filtraron a través de una
membrana de 0,2
µ
m de diámetro de poro y se observaron con objetivo de inmersión en un
microscopio de epifluorescencia (Nikon). Se contaron el número de células verdes (vivas) y
rojas (muertas), expresando el resultado como número de microorganismos totales y vivos
por mililitro de agua (3).
El número de microorganismos totales ha sido de 8,5 x 10
4
/mL en el manantial y
9,8 x 10
4
/mL en el sondeo, estando la mayoría vivos, 67,2 % y 72,4 %, respectivamente.
Figura 2.-
Puntos de emergencia. a, b) manantial; c) sondeo; d) depósitos.
