J. de Juan-‐Sanz & col.
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de médula espinal de rata en presencia o ausencia de 10 µM PGE2 durante
diferentes tiempos. Estas medidas se realizan midiendo la cantidad de glicina
tritiada incorporada en los sinaptosomas por unidad de tiempo, y se realizan en
presencia de NFPS (un inhibidor específico de GlyT1) para cuantificar el transporte
de glicina radiactiva únicamente debido a la actividad de GlyT2. Como se observa
en la Figura 1, fuimos capaces de determinar que efectivamente PGE2 produce
variaciones sobre la recaptación llevada a cabo por GlyT2. Así, observamos que la
actividad de GlyT2 aumenta de un modo dependiente del tiempo en presencia de
PGE2, llegando a alcanzar un aumento del transporte del 66,43 ± 6,3% a los 60
minutos, pero detectándose a los 30 min con una activación significativa del 32,33
± 4,1%.
Figura 1.-‐ PGE2 activa el transporte mediado por GlyT2 en sinaptosomas de médula espinal
de rata.
Los sinaptosomas de médula espinal de rata fueron incubados durante los tiempos
indicados en presencia de 10 µM PGE2. Se determinó la cantidad de glicina tritiada incorporada,
midiendo cada tiempo ensayado por cuadruplicado, y se muestra la media resultante de cuatro
experimentos ± SEM (error estándar de la media). La comparación entre los distintos tiempos se
realizó mediante el análisis de la varianza (
ANOVA
). Los niveles de significación corresponden a * p
< 0,05 y *** p < 0,001.
La PGE2 es liberada durante eventos de dolor inflamatorio, y puede realizar
su efecto a través de cuatro posibles receptores: EP1, EP2, EP3 y EP4. Estos
receptores se expresan en una amplia de mayoría tejidos, incluyendo la médula
espinal (22, 23) y median su acción a través de diferentes cascadas de señalización
(24, 25). Para determinar la implicación de los distintos subtipos de receptores en
la activación de GlyT2 por PGE2, quisimos cuantificar la expresión de cada uno en
sinaptosomas de médula espinal de rata. De este modo, la expresión del receptor,
que está estrechamente ligada a su posible acción, indica la capacidad de
transducción de esa vía en concreto en la muestra de interés. Así, mediante la
