J. de Juan-‐Sanz & col.
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Figura 4.-‐ PGE2 disminuye la ubiquitinación de GlyT2.
A-‐B) 200 µg de sinaptosomas de médula
espinal de rata fueron incubados durante 1 hora a 37ºC en presencia de vehículo (Veh) o 10 µM
PGE2. Después de esto se separaron 10 µg para cuantificar proteína total (A, parte izquierda) y
sobre el resto (190 µg) se inmunoprecipitaron las proteínas ubiquitinadas con un anticuerpo anti-‐
multi ubiquitina unido a agarosa. Tras separar las proteínas en gel SDS-‐PAGE se determinó la
cantidad de GlyT2 total y ubiquitinado (A, parte derecha). Como se observa, la presencia de PGE2
produce una bajada de GlyT2 ubiquitinado, mientras que la proteína total se mantiene constante. B)
Cuantificación de tres experimentos independientes como el mostrado en A. Se muestra la cantidad
de GlyT2 ubiquitinado como porcentaje del control (Veh). La comparación entre ambas condiciones
se realizó mediante una prueba t de Student. p < 0,05 se consideró significativo, y se denota con *.
4. DISCUSIÓN
La falta de inhibición mediada por la neurotrasmisión glicinérgica en la
médula espinal se ha demostrado como una característica claramente implicada en
el aumento de la sensación de dolor (14, 35). Uno de los mecanismos descritos que
regula este tipo de neurotransmisión se basa en una inhibición específica de la
subunidad GlyRα3 del receptor de glicina en presencia de la prostaglandina E2
(PGE2), uno de los mediadores más importantes de la inflamación (15-‐17). Esta
inhibición ocurre a través de los receptores EP2, que producen un aumento del
AMPc intracelular. Esto provoca una activación a la proteína kinasa A (PKA) que
fosoforila específicamente a la subunidad GlyRα3 del receptor de glicina en la
serina de la posición 346, impidiendo su acción y por tanto reduciendo la
neurotransmisión glicinérgica inhibidora (18).
El óptimo funcionamiento de la neurotransmisión glicinérgica requiere por
tanto la correcta actividad y localización del receptor de glicina. Sin embargo, otras
muchas proteínas son necesarias, y tienen la capacidad de regular este tipo de
neurotransmisión. Un ejemplo claro es el transportador neuronal presináptico
GlyT2, ya que ratones deficientes en esta proteína tienen completamente alterada
la neurotransmisión glicinérgica (21). Sin embargo, hasta la fecha se han realizado
muy pocos estudios que profundicen sobre la posible implicación de este
transportador en el procesamiento del dolor, a pesar de que recientemente se ha
propuesto como una interesante diana analgésica, ya que se ha descrito que su
